На главную страницу ||


А.А.Кубанов, И.Н.Авдиенко

Влияние низких и средних доз ультрафиолетового излучения УФА-1 диапазона с длиной волны 350-400 нм на показатели иммунного воспаления в коже больных атопическим дерматитом

(опубликовано: Вестник Дерматологии и Венерологии, Москва, ООО «ДЭКС-Пресс», 2011 г., №1, стр. 28-35)


В настоящей работе продемонстрировано, что в пораженной коже больных атопическим дерматитом в отличие от здоровых добровольцев наблюдается увеличение содержания CD4+ лимфоцитов и экспрессии у-интерферона в дерме. Под влиянием УФА-1 терапии у больных с клиническим выздоровлением выявляется более выраженная положительная динамика содержания ?-ИФН+ клеток в коже (р=0,004) по сравнению с пациентами, достигшими улучшения кожного процесса, а также существенное снижение содержания Т-хелперов в очагах поражения (р=0,009).
Ключевые слова: атопический дерматит, терапия ультрафиолетовым излучением длиной волны 350-400 нм, гамма-интерферон, CD4+ и CD8+ лимфоциты.

Об авторах:
А.А.Кубанов - заместитель директора по научной работе ФГУ «ГНЦДК Минздравсоцразвития», г. Москва, д.м.н.
И.Н. Авдиенко - врач-дерматовенеролог ФГУ «ГНЦДК Минздравсоцразвития России», г. Москва


Атопический дерматит (АтД) является многофакторным заболеванием, возникающим при наличии генетической предрасположенности к атопии, приводящим к повышению уровня иммуноглобулина Е (IgE) и развивающимся под воздействием факторов внешней среды [1-4]. Хотя в настоящее время не существует единого мнения об этиологии и патогенезе заболевания, важнейшая роль в патогенезе АтД принадлежит нарушениям иммунитета. Согласно одной из теорий в основе АтД лежит дисфункция иммунной системы, приводящая к IgE-зависимой сенсибилизации с последующим нарушением барьерной функции эпидермиса и, как следствие, к локальному воспалению. Другая теория предполагает, что нарушение барьерной функции кожи, обусловленное внутренним дефектом эпителиальных клеток, первично, а иммунологические изменения возникают как следствие [5].

Одним из основных звеньев патогенеза АтД является повышенный синтез и секреция Т-хелперами 1-го и 2-го типов цитокинов: интерлейкин-4, интерлейкин-5, интерлейкин-13, гамма-интерферон (?-ИФН) и других [2, 6-9]. При этом каждый из секретируемых цитокинов определяет выраженность клинических проявлений заболевания. В период обострения заболевания у больных АтД в дермальных инфильтратах эритематозно-сквамозных очагов поражения преобладают Т-хелперы 2-го типа (Т-х2), в период ремиссии в очагах лихенизации - нативные Т-хелперы (Т-х0) и Т-хелперы 1-го типа (Т-x1). Причины, приводящие к доминированию Т-х2 в период обострения у больных АтД, остаются неясными. При гистологическом исследовании в очагах поражения кожи у пациентов АтД обнаруживают инфильтраты в дерме, содержащие CD4+ (Т-хелперы) и CD8+ (цитотоксические Т-лимфоциты) субпопуляции Т-лимфоцитов [10-14].

Существуют единичные сообщения о влиянии УФА-1 терапии на показатели клеточного иммунитета в коже больных АтД. По данным R. Mang и соавт., под воздействием высоких доз УФА-1 терапии наблюдается исчезновение Т-лимфоцитов из очагов поражения при АтД, что сопровождается снижением уровня ?-ИФН in situ и клинически соответствует ремиссии заболевания [15]. М. Grewe и соавт. выявили в очагах поражения больных АтД высокий уровень кодирующей ?-ИФН мРНК, достоверно снижающийся после проведения курса УФА-1 терапии высокими дозами [16]. Однако механизм действия ультрафиолетового излучения УФА-1 диапазона длиной волны 350-400 нм на кожный патологический процесс при АтД остается не до конца изученным. Изучению этой проблемы и посвящено настоящее исследование.

Материал и методы

В работу включали больных со среднетяжелым и тяжелым течением АтД, старше 18 лет, которым проводили дальнюю длинноволновую ультрафиолетовую терапию.

Терапию ультрафиолетовым излучением длиной волны 350-400 нм проводили в ультрафиолетовой кабине «Waldmann UV 7001 К», Herbert Waldmann GmbH & Со (Германия), с лампами F85/100W-TL10R, генерирующими излучение длиной волны 350-400 нм с максимумом эмиссии при длине волны 370 нм. Процедуры дальней длинноволновой ультрафиолетовой терапии проводили пациентам с АтД 4-5 раз в неделю. Облучение начинали с разовой дозы 5-10,0 Дж/см2. При назначении начальной дозы облучения учитывали тип кожи и индивидуальную чувствительность больного к ультрафиолетовому свету. При каждой последующей процедуре дозу облучения увеличивали на 5-10 Дж/см2. При этом максимальная разовая доза облучения равнялась 15-40 Дж/см2. Средняя кумулятивная доза дальней длинноволновой ультрафиолетовой терапии на курс лечения составила 395,7 ± 125,3 Дж/см2, при этом минимальное и максимальное значения данного показателя были равными 155 и 670 Дж/см2 соответственно. Количество процедур, выполненных на один курс лечения, варьировало от 11 до 28. Среднее значение данного показателя составило 18,9 ± 4,4 процедур.

Оценку тяжести АтД проводили с использованием индекса SCORAD (Scoring of Atopic Dermatitis - количественная оценка атопического дерматита). Клиническую эффективность терапии ультрафиолетовым излучением длиной волны 350-400 нм определяли по динамике индекса SCORAD после проведенного курса лечения.

Забор биоптатов кожи у 15 больных АтД, включенных в настоящее исследование, до лечения проводили из эритематозно-сквамозных очагов поражения, а после завершения лечения - из участков кожи, располагавшихся рядом с местом предыдущей биопсии. В контрольную группу были включены 7 здоровых добровольцев, сопоставимых по полу и возрасту с исследуемой группой. Полученные биоптаты кожи фиксировали в 10% растворе формалина.

Далее их заливали в парафиновые блоки, из которых на микротоме Leica RM2125RT изготавливали срезы толщиной 5 мкм. Срезы растягивали на предметных стеклах с полилизиновым покрытием, помещая их на нагревательный столик. Подготовленные препараты сушили в термостате.

Для иммуногистохимического исследования биоптатов кожи после процедуры депарафинизации в 3 сменах ксилола и 3 сменах этилового спирта срезы подвергали регидратации, затем промывали в проточной воде. Антигенную демаскировку проводили, помещая препараты в цитратный буфер. С целью предотвращения неспецифического окрашивания на срезы наносили пероксидазный и протеиновый блоки Peroxydase Detection System (Novocastra Lab. LTD, Великобритания). Для проведения иммуногистохимической реакции срезы кожи инкубировали с моноклональными антителами CD4, CD8 (Novocastra Lab. LTD, Великобритания) в рабочем разведении 1:150 при комнатной температуре и антителами ?-ИФН (Abbiotec LLC, США) в рабочем разведении 1:200 при комнатной температуре. Для визуализации иммуногистохимической реакции использовали стрептавидин-биотиновую систему и DAB-хромоген (система визуализации на основе стрептавидин-биотинового комплекса «Novocastra» RTU, Novocastra Lab. LTD, Великобритания). Затем препараты докрашивали гематоксилином, подвергали процедуре дегидратации в этиловом спирте, дифференцировке в ксилоле и заключали под покровное стекло посредством монтирующей среды для гистологических препаратов. В дальнейшем проводилось изучение полученных препаратов в световом микроскопе Leica DM 4000В, для документирования результатов исследования использовали цифровую камеру Leica DFC 320.

В эпидермисе количество CD4+, CD8+ лимфоцитов изучали из расчета на 100 клеток базального слоя, а оценку уровня экспрессии ?-ИФН определяли по наличию или отсутствию положительно окрашенных клеток. В дерме подсчет количества CD4+, CD8+ лимфоцитов, а также ?-ИФН+ клеток производили в 5 полях зрения, равных по площади 0,3 мм2. Затем считали средние значения абсолютного содержания CD4+, CD8+ лимфоцитов, ?-ИФН+ клеток для каждого препарата.

Обработка полученных данных проводилась на персональном IBM совместимом компьютере с процессором Intel® Pentium® М 740 с использованием пакета статистических программ Sigma Stat версия 3.1 и Statistica версия 6.0. Для оценки количественных показателей применяли непараметрические (Уилкоксона, Фридмана) и параметрические (Стьюдента) критерии. Результаты анализа представлены в виде: медиана (25 процентиль - 75 процентиль) либо среднее по группе значение ± стандартное отклонение измеренных значений. Различия считали достоверными при р < 0.05.

Результаты и обсуждение

До начала терапии кожный процесс у включенных в исследование больных локализовался на симметричных участках кожи туловища, сгибательной поверхности верхних и нижних конечностей, коже лица и шеи и был представлен распространенными эритематозными очагами ярко-розового цвета, сливающимися между собой, и отечностью различной степени выраженности, фолликулярными и лентикулярными папулами, очагами лихенизации преимущественно в локтевых и коленных сгибах, мелко и/или среднепластинчатым шелушением по всему кожному покрову, а также множественными экскориациями, покрытыми геморрагическими корками (рис. 1 а). На коже лица у большинства больных в периорбитальной области отмечался положительный симптом Денни-Моргана, наблюдался хейлит, щелевые импетиго в углах рта.

После курса проведенного ультрафиолетового лечения объективно наблюдали регресс эритематозно-сквамозных очагов поражения, значительное уменьшение инфильтрации и лихенизации, уменьшение площади поражения кожи, субъективно пациенты отмечали снижение интенсивности зуда или его полное исчезновение, улучшение сна (рис. 1 б). Наблюдаемое клиническое улучшение подтверждалось статистически достоверным снижением индекса SCORAD в 3,7 раза (с 71,9 ± 12,7 исходно до 19,2 ± 13,3 после курса проведенной УФА-1 терапии).

В эпидермисе больных АтД до начала лечения выявляли единичные CD4+ и CD8+ Т-лимфоциты. При иммунофенотипировании моноклональными антителами к ?-ИФН отмечалась положительная реакция в базальном, шиловидном и зернистом слоях и отрицательная в роговом слое эпидермиса. У здоровых лиц Т-хелперы и цитотоксические Т-лимфоциты в эпидермисе отсутствовали, реакция с моноклональными антителами к ?-ИФН также была отрицательной.

а
б
Рис.1. Больной З. 33 года, до лечения (а) и после курса УФА-1 терапии (б)

а
б
Рис. 2. Иммуногистохимическая реакция с моноклональными антителами к CD8 в биоптате кожи больного атопическим дерматитом
до лечения (а) и здорового добровольца (б). Увеличение х400

а
б
Рис. 3. Иммуногистохимическая реакция с моноклональными антителами к CD4 в биопате кожи больного атопическим дерматитом
до лечения (а) и здорового добровольца (б). Увеличение х400

В дерме больных АтД CD4+ и CD8+ лимфоциты, ?-ИФН+ клетки располагались периваскулярно и в воспалительных инфильтратах, а у здоровых лиц были выявлены единичные Т-хелперы и цито токсические Т-лимфоциты в поле зрения, между коллагеновыми волокнами обнаруживали единичные ?-ИФН+ клетки (рис. 2, 3, 4).

После проведенного лечения в эпидермисе всех больных АтД сохранялись единичные CD4+ и CD8+ лимфоциты, ?-ИФН+ клетки. У 8 из 15 больных сохранялась положительная реакция на ?-ИФН в кератиноцитах верхних рядов шиповатого и зернистого слоев. В базальном и нижних рядах шиповатого слоя эпидермиса у этих больных ?-ИФН в кератиноцитах не выявлялся. При этом в дерме после курса УФА-1 терапии сохранялись положительно окрашенные CD4+ и CD8+ лимфоциты, а также ?-ИФН+ клетки, которые располагались как периваскулярно, так и в составе инфильтратов (рис. 5).

После подсчета клеток и проведения статистического анализа было выявлено достоверное (р < 0,001) увеличение количества CD4+ лимфоцитов в дерме больных АтД 23 [13,4; 32,7] по сравнению со здоровыми добровольцами 3,2 [1,9; 4,1], а также ?-ИФН+ клеток 25 [20,5; 41,1] и 0 [0; 0,2] соответственно (р< 0,001). Количество CD8+ лимфоцитов в дерме больных АтД и здоровых лиц было сопоставимо 7,8 [3,6; 13,7] против 4 [3,7; 4,7] соответственно (р= 0,084) (рис. 6).

а
а
б
б
Рис. 4.
Иммуногистохимическая реакция
с моноклональными антителами
к ?-ИФН в биоптате кожи больного АтД (а)
и здорового добровольца (б).
Увеличение х200
Рис. 5.
Иммуногистохимическая реакция с моноклональными антителами
к ?-ИФН после УФА-1 терапии
в биоптате коже больного АтД подгруппы улучшения (а)
и больного подгруппы выздоровления (б).
Увеличение х200

При изучении динамики показателей иммуно-гистохимического исследования кожи больных АтД после проведения курса УФА-1 терапии статистически достоверных изменений количества CD4+, CD8+ лимфоцитов, а также ?-ИФН+ клеток в дерме выявлено не было (табл. 1).

Таблица 1. Содержание CD4+, CD8+ лимфоцитов и ?-ИФН+ клеток в дерме больных атопическим дерматитом до и после курса УФА-1 терапии, количество клеток в поле зрения, Me [Q1; Q3]

Субпопуляция
До УФА-1 терапии
После УФА-1 терапии
p
CD4+ лимфоциты
23 [13,4; 32,7]
20 [10,5; 25,7]
0,22
CD8+ лимфоциты
7,8 [3,6; 13,7]
11,0 [8,9; 12,6]
0,21
?-ИФН+ клетки
25,0 [20,5; 41,1]
29,3 [20,7; 3,2]
0,79

В зависимости от эффекта терапии ультрафиолетовым излучением с длиной волны 350-400 нм больные АтД были разделены на две подгруппы: выздоровления и улучшения. В подгруппу улучшения было включено 7 больных АтД, у которых после курса УФА-1 терапии наблюдаемое снижение индекса SCORAD составило от 30 до 80%. Подгруппу выздоровления составили 8 пациентов, у которых индекс SCORAD снижался более чем на 80% по сравнению с исходным значением.

Достоверных различий между подгруппами выздоровления и улучшения до начала ультрафиолетовой терапии длиной волны 350-400 нм по количеству CD4+, CD8+ лимфоцитов и ?-ИФН+ клеток выявлено не было.

После курса УФА-1 терапии в биоптатах пациентов подгруппы выздоровления количество ?-ИФН+ клеток было в 1,8 раза меньше, чем в подгруппе больных с улучшением (соответственно 20,9 [18,6; 27,0] и 37,3 [33,7; 51,5]; р=0,004). В биоптатах, взятых у этих пациентов после терапии, выявлено также более низкое, чем в подгруппе улучшения, содержание CD4+ лимфоцитов (19,0 [6,2; 20,3] и 23,0 [18,7; 41,5] соответственно). Однако различия были статистически не значимыми (p=0,052). Количество CD8+ лимфоцитов в подгруппах клинического выздоровления (9,5 [6,9; 11,8]) и улучшения (12,2 [10,1; 13,4) статистически достоверно не различалось.

В подгруппе улучшения после проведения курса УФА-1 терапии статистически достоверных изменений ни одного из изучаемых иммуногистохимических показателей выявлено не было (табл. 2). В подгруппе клинического выздоровления наблюдали статистически достоверное (р= 0,009) снижение содержания СD4+ лимфоцитов в дерме в 1,7 раза после курса УФА-1 терапии. Количество ?-ИФН+ клеток, также как и CD8+ лимфоцитов, после проведенного лечения статистически достоверно не изменялось (табл. 3).

Таблица 2. Динамика содержания в дерме CD4+ и CD8+ лимфоцитов, ?-ИФН+ клеток в подгруппе улучшения после УФА-1 терапии, количество клеток в поле зрения, Me [Q1; Q3]

Субпопуляция лимфоцитов
До лечения
После лечения
p
CD4+ лимфоциты
18,4 [12,7; 30,6]
29,0 ± 16,0
0,38
CD8+ лимфоциты
8,0 [5,3; 13,5]
12,3 ± 4,4
0,32
?-ИФН+ клетки
25,0 [15,4; 50,2]
42,5 ± 13,6
0,17

Таблица 3. Динамика содержания в дерме CD4+ и CD8+ лимфоцитов, ?-ИФН+ клеток в подгруппе выздоровления после УФА-1 терапии, количество клеток в поле зрения, Me [Q1; Q3]

Наименование субпопуляции
До лечения
После лечения
p
CD4+ лимфоциты
23,2 [15,3; 36,0]
19,0 [6,2; 20,3]
0,009
CD8+ лимфоциты
6,3 [3,2; 13,2]
9,5 [6,9; 11,8]
0,60
?-ИФН+ клетки
27,3 [20,6; 39,5]
20,9 [18,6; 27,0]
0,32

Рис.6. Содержание CD4+ и CD8+ лимфоцитов, ?-ИФН+ клеток в дерме больных атопическим дерматитом и здоровых добровольцев.
Примечание. * Различия статистически достоверны (р < 0,001)

Обсуждение

В ходе проведенного нами исследования в дерме больных АтД было выявлено статистически достоверное повышение количества CD4+ лимфоцитов и клеток, содержащих ?-ИФН. Аналогичные результаты исследования биоптатов кожи больных АтД получены в исследованиях Курченко А. И., Grewe et al., Spergel JM. et al., Neumann C. et al, Thepen T. et al., Lugovic L. et al. [12, 16, 17, 18]. Так, в своем исследовании Lugovic L. et al. обнаружили повышение экспрессии ?-ИФН и количества CD4+, CD8+ Т-лимфоцитов в эпидермисе больных АтД по сравнению с соответствующими показателями здоровых добровольцев [19].

В ранее опубликованной работе Grewe и соавт. (1994 г.) в очагах поражения больных АтД был выявлен высокий уровень кодирующей ?-ИФН мРНК, достоверно снижающийся после проведения курса УФА-1 терапии высокими дозами [16]. В дальнейшем опыте in vitro эти авторы, облучая культивируемые нормальные человеческие кератиноциты ультрафиолетовым излучением УФА-1 диапазона, показали, что снижение продукции ?-ИФН Т-x1 связано с индуцированием экспрессии мРНК ИЛ-10 и его секрецией кератиноцитами [20].

В нашем исследовании после проведенного ультрафиолетового лечения статистически достоверных различий изучаемых показателей (CD4+, CD8+ Т-лимфоцитов, а также ?-ИФН+ клеток) у больных АтД выявлено не было.

Согласно результатам ранее опубликованных исследований известно, что у 80% больных АтД экспрессия ?-ИФН коррелирует с тяжестью заболевания и уменьшается при успешном лечении [10].

Полученные нами данные позволяют предположить, что динамика ?-ИФН под влиянием низких и средних доз УФА-1 терапии изменяется двухфазно с первоначальным увеличением его содержания и последующим снижением. Для подтверждения данной гипотезы необходимо проведение новых исследований.

Анализ опубликованных к настоящему моменту работ позволяет предположить, что увеличение содержания ?-ИФН в биоптатах кожи может быть опосредовано двумя механизмами: стимуляцией его образования Т-лимфоцитами, приводящей к избыточной секреции данного цитокина, или в результате гибели клеток, его содержащих. Действительно, ?-ИФН может воздействовать на клеточную пролиферацию и апоптоз, стимулируя образование различных проапоптотических молекул: каспазы-1, катепсина Д, Fas/аполипопротеина [21, 22]. Х.Х. et al. показали, что посредством стимуляции Fas и Fas-лиганда ?-ИФН может приводить к развитию апоптоза клеток кожи [23]. Помимо этого ?-ИФН стимулирует образование активных форм кислорода (супероксида кислорода и его продуктов) [24]. Таким образом, эти процессы приводят на первом этапе применения УФА-1 терапии к увеличению содержания ?-ИФН в межклеточном пространстве, что мы наблюдали в группе клинического улучшения.

Постепенная элиминация клеток кожи, продуцирующих ?-ИФН, происходящая в результате их программируемой гибели, приводит к снижению их количества и, как следствие, к снижению уровня данного цитокина в межклеточном пространстве. По-видимому, данным феноменом может быть обусловлено снижение уровня ?-ИФН у большинства пациентов группы клинического выздоровления.

Сказанное выше позволяет предположить, что в группе клинического улучшения количество выполненных УФА-1 процедур было недостаточным для достижения клинического выздоровления. Следовательно, больным, у которых после проведенного лечения изменение индекса SCORAD составило менее 80% от исходной величины (группа клинического улучшения в настоящем исследовании), необходимо увеличить количество процедур УФА-1 терапии. Однако данная гипотеза требует проведения новых клинических исследований.

Заключение

В пораженной коже больных атопическим дерматитом в отличие от здоровых добровольцев регистрируется достоверное увеличение экспрессии ?-интерферона в дерме, указывающее на наличие хронического иммунного воспаления. В процессе лечения у больных с клиническим выздоровлением выявляется более выраженная положительная динамика содержания ?-ИФН+ клеток в коже (р=0,004) по сравнению с пациентами, достигшими улучшения кожного процесса, что свидетельствует об участии данного цитокина в механизмах действия УФА-1 излучения.

У пациентов, достигших в процессе лечения клинического выздоровления, данный вид лечения приводит к существенному снижению содержания Т-хелперов (CD4+ лимфоцитов) в очагах поражения (р=0,009), что свидетельствует об иммуносупрессивном действии УФА-1 излучения на кожно-ассоциированные Т-лимфоциты.



Литература:

1. Атопический дерматит: рекомендации для практических врачей. Под ред. Хаитова Р. М., Кубановой А. А. М.: Фармус Принт. 2002; 192.
2. Bieber Т., Novak N. Pathogenesis of atopic dermatitis: new developments. Curr. Allergy Asthma Rep2009; 9: 291-294.
3. Novak N. New insights into the mechanism and management of allergic diseases: atopic dermatitis. Allergy 2009; 64: 265-275.
4. Schmid-Grendelmeier P., Simon D., Simon H. U. et al. Epidemiology, clinical features, and immunology of the «intrinsic» (non-lgE- mediated) type of atopic dermatitis (constitutional dermatitis). Allergy 2001; 56: 841-849.
5. Elias P.M., Steinhoff M. «Outside-to-inside» (and now back to «outside») pathogenic mechanisms in atopic dermatitis. J. Invest. Dermatol. 2008; 128: 1067-1070.
6. Дранник Г H. Клиническая иммунология и аллергология. М.: МИА. 2003; 604.
7. NovakN., BieberT., LeungD.Y. Immune mechanisms leading to atopic dermatitis. J. Allergy. Clin. Immunol. 2003. Vol. 112. p. SI28-139.
8. Сергеев Ю. В. Атопический дерматит: новые подходы к профилактике и наружной терапии. Рекомендации для врачей. М.: Медицина для всех. 2003; 56.
9. Akdis С. A., Akdis М., Bieber Т. et al. Diagnosis and treatment of atopic dermatitis in children and adults. J. Allergy. Clin. Immunol. 2006; 118: 152-169.
10. Сергеев Ю. В., Новиков Д. К., Караулов А. В. и др. Атопический дерматит: гетерогенность клинических форм и разнообразие механизмов патогенеза. Иммунопатология, аллергология, инфектология. 2001; 61-73.
11. Ring J., Pzrybilla В., Ruzicka Т. Handbook of Atopic Eczema. Berlin: Springer, 2006. 615 p.
12. Курченко А. И. Сравнительная характеристика иммуногистохимической картины очагов поражения кожи у больных с IgE- зависимой и lgE-независимой формами атопического дерматита. Украшський медичний часопис. 2006; 1: 114-117.
13. Кунгуров Н. В. Иммунологические аспекты атопического дерматита. Вестн. дерматол. и венерол. 1999; 3: 14-17.
14. Leung D. Y. Pathogenesis of atopic dermatitis. J. Allergy. Clin. Immunol. 1999; 104: S99-I08.
15. Mang R., Krutmann J. UVA-1 Phototherapy. Photodermatol. Pho toimmunol. Photomed. 2005; 21: 103-108.
16. Grewe M., Gyufko K., Schopf E., Krutmann J. Lesional expression of interferon-gamma in atopic eczema. Lancet 1994; 343: 25-26.
17. Thepen Т., Langeveld-Wildschut E.G., Bihari I.C. et al. Biphasic response against aeroallergen in atopic dermatitis showing a switch from an initial TH2 response to a TH 1 response in situ: an immunocytochemical study. J. Allergy. Clin. Immunol. 1996; 97: 828-837.
18. Spergel J. M., Mizoguchi E., Oettgen H. et al. Roles of THI and TH2 cytokines in a murine model of allergic dermatitis. J. Clin. Invest. 1999; 103: 1103-1111.
19. Lugovic L., Lipozencic J., Jakic-Razumovic J. Prominent involvement of activated Thl-subset of T-cells and increased expression of receptor for IFN-gamma on keratinocytes in atopic dermatitis acute skin lesions. Int. Arch. Allergy. Immunol. 2005; 137: 125-133.
20. Grewe M., Gyufko K., Krutmann J. Interleukin-10 production by cultured human keratinocytes: regulation by ultraviolet В and ultraviolet Al radiation. J. Invest. Dermatol. 1995; 104: 3-6.
21. Villa P., Kaufmann S. H., Earnshaw W. C. Caspases and caspase inhibitors. Trends. Biochem. Sci. 1997; 22: 388-393.
22. Deiss L. P., Galinka H., Berissi H. et al. Cathepsin D protease mediates programmed cell death induced by interferon-gamma, Fas/ APO-1 and TNF-alpha. EMBO J. 1996; 15: 3861-3870.
23. X. X., F.X.Y., Plate J., Chong A.S. IFN-gamma induces cell growth inhibition by Fas-mediated apoptosis: requirement of STAT1 protein for up-regulation of Fas and FasL expression. Cancer. Res. 1998; 58: 2832-2837.
24. Schroder K., Hertzog P. J., Ravasi Т., Hume D.A. lnterferon-gamma: an overview of signals, mechanisms and functions. J. Leukoc. Biol. 2004; 75: 163-189.